1. Définition.

L'acide sorbique est identifié et dosé par l'application de la méthode décrite ci-après.

La teneur en acide sorbique est exprimée en milligramme par kilogramme.

2. Principe.

Extraction de l'acide sorbique par l'isooctane en milieu acide. Spectrophotométrie d'absorption moléculaire en ultra-violet.

2.1. Identification.

Etablissement du spectre d'absorption entre 220 et 400 nm et comparaison avec un spectre réalisé à partir d'une solution aqueuse pure de sorbate de potassium.

2.2. Dosage.

Détermination de l'absorbance au maximum d'absorption et quantification à l'aide d'une courbe étalon établie à partir d'une solution de sorbate de potassium en milieu sucré.

3. Réactifs.

Les réactifs doivent être de qualité analytique. L'eau utilisée doit être de l'eau distillée ou de l'eau de pureté au moins équivalente.

3.1. Isooctane (triméthyl-2,2,4 pentane) de qualité pour spectrophotométrie U.V.

3.2. Acide phosphorique r 20 = 1,70 g/ml.

3.3. Sorbate de potassium.

3.4. Saccharose.

4. Appareillage.

Matériel courant de laboratoire, et notamment :

4.1. Spectrophotomètre U.V.

4.2. Cuves de quartz de 1 cm de trajet optique.

4.3. Tubes cylindriques de 50 ml à bouchon vissant muni d'un joint téflon.

5. Mode opératoire.

5.1. Mise en solution.

Introduire une prise d'essai (E) de 15 grammes environ, pesée à 1 centigramme près, dans une fiole jaugée de 200 ml et ajouter 150 ml d'eau amenée à environ + 60 °C. Laisser macérer deux heures en agitant modérement.

Ajuster au trait de jauge. Mélanger. Filtrer sur filtre plissé. 5.2. Identification.

Conduire l'extraction comme indiqué en 5.3.2. et établir un spectre d'absorption de la phase organique en prenant l'isooctane (3.1) comme référence.

Comparer les caractéristiques de ce spectre à celles d'un spectre établi à partir d'une solution aqueuse pure de sorbate de potassium à 134 mg par litre, traitée dans les mêmes conditions.

5.3. Dosage.

5.3.1. Réalisation de la gamme-étalon :

a) Préparation de la solution-mère : dissoudre 134 mg, exactement pesés, de sorbate de potassium (correspondant à 100 mg d'acide sorbique) dans 100 ml de solution de saccharose d'une concentration calculée à partir de l'indice de réfraction déterminé par ailleurs ; b) Préparation des solutions-filles : introduire 2,5, 5 et 10 ml de solution mère dans, respectivement, trois fioles jaugées de 100 ml. Compléter au trait de jauge avec la solution de saccharose. Mélanger. Les concentrations respectives exprimées en acide sorbique des solutions filles sont : 25, 50 et 100 mg/litre (A1, A2 et A3). 5.3.2. Extraction.

Dans des tubes (4.3) distribuer les réactifs selon les indications du tableau 2. Ajouter deux billes de verre. Obturer et agiter énergiquement pendant deux minutes. Laisser reposer cinq minutes.

5.3.3. Construction de la courbe d'étalonnage. Porter en ordonnée les absorbances lues au maximum d'absorption pour A1, A2, A3 et en abscisse les teneurs correspondantes en acide sorbique en milligramme par litre.

6. Expression des résultats.

6.1. Mode de calcul et formule.

La teneur en acide sorbique est donnée par la relation suivante :

Acide sorbique mg/kg = S. 200. 1 000E. 1 000 = S. 200E,

où :

E est la masse, en gramme, de la prise d'essai (5.1) ;

S est la concentration lue sur la courbe d'étalonnage pour le filtrat (5.1).

6.2. Répétabilité.

La différence entre les résultats de deux déterminations effectuées simultanément ou rapidement, l'une après l'autre, par le même analyste ne doit pas excéder 5 p. 100 en valeur relative.

Tableau n° 2 :

Volumes des réactifs, blanc A1, A2, A3 et filtrat.

Solution de saccharose (5.3.1) : 0,25 ml.

Solutions-filles de sorbate de potassium : 0,25 ml, 0,25 ml, 0,25 ml.

Filtrat (5.1) : 0,25 ml.

Acide phosphorique (3.2) : 0,1 ml, 0,1 ml, 0,1 ml, 0,1 ml, 0,1 ml.

Isooctane (3.1) : 10 ml, 10 ml, 10 ml, 10 ml, 10 ml.