La méthode est basée sur la réaction colorée du captane (ou du phaltane) avec la résorcine à 140° C.

REACTIFS

a) Benzène distillé.

b) Résorcine pure (sèche).

c) Acide acétique glacial.

d) Octane pur : Pt Eb. : 124-126° (Eastman Kodak).

e) Décane pur : Pt Eb. : 174° (Eastman Kodak).

f) Sulfate de sodium anhydre, R.P..

g) Charbon activé "Nuchar Attaclay" Wilkens Instr. Cy..

Solution de références :

A (stock) - 50 mg dans 50 ml de benzène = 1 mg par millilitre.

B (travail) - Diluez la solution A au 1/25 = 0,04 mg par millilitre.

C (travail) - Diluez la solution B au 1/4 = 0,01 mg par millilitre.

MATERIEL

Ampoules à décantation de 250 ou 500 ml et de 50 ou 100 ml.

Kuderna-Danish ou réfrigérant adaptable par rodage à un tube à essai en verre résistant à la chaleur de 50 ml.

Evaporateur rotatif avec pompe à vide.

Spectrophotomètre (visible).

ETALONNAGE

Dans un tube en verre résistant à la chaleur de 15-50 ml à rodage émeri, adaptable à un appareil Kuderna-Danish ou à un réfrigérant de 30 cm, placez :

1 ml de solution C (soit 0,010 mg de captane) ;

1 g de résorcine ;

3,5 ml d'octane et 1,5 ml de décane (soit 5 ml du mélange des deux hydrocarbures bouillant vers 141° plus ou moins 2° C).

Faites bouillir sous reflux 10 à 15 mn modérément.

Avant refroidissement, par le haut du réfrigérant ou après avoir libéré le tube en verre résistant à la chaleur, ajoutez 3 ml d'acide acétique glacial.

Mélangez et laissez refroidir.

Transvasez le mélange dans une ampoule à décantation de 50 ml environ.

Transvasez le mélange dans une ampoule à décantation de 50 ml environ.

Rincez le tube avec 1 ml d'acide acétique.

Transvasez cet acide de lavage dans l'ampoule, sans agiter cette ampoule de manière à ne pas mélanger cet acide au précédent saturé de résorcine.

Cette précaution permet d'isoler trois phases :

La phase inférieure concentrée en résorcine est colorée en jaune ;

La phase intermédiaire est incolore ;

La phase supérieure renferme les hydrocarbures (qui pourront être récupérés pour un nouveau dosage).

Soutirez les deux phases inférieures acides dans un ballon jaugé de 10 ml, l'acide acétique de sa deuxième phase rinçant les parois de l'ampoule et la lumière du robinet.

Complétez au trait de jauge avec de l'acide acétique.

Mesurez la densité optique à 428 microns dans une cuve de 1 cm d'épaisseur par rapport à la solution témoin obtenue dans les mêmes conditions à partir de 1 ml de benzène au lieu et place de la solution C.

Normalement, la teinte de ce témoin est très faible et sa densité optique par rapport à l'acide acétique pur est de l'ordre de 0,01 indiquant que la résorcine utilisée est suffisamment pure.

Dans ce cas, l'acide acétique pourra être utilisé comme solution de référence pour les autres mesures.

Pour construire la droite d'étalonnage, opérez de même successivement avec :

0,5, 2 et 3 ml de solution C, soit respectivement 5, 20 et 30 microgrammes de captane et avec 1, 1,5 et 2 ml de solution B, soit respectivement 40, 60 et 80 microgrammes de captane.

Réduisez à 1, 1,5 ml environ par évaporation au bain-marie sous un jet d'air froid dirigé au fond du tube, lorsque le volume dépasse 1,5 ml.

Tracez la droite d'étalonnage.

NOTA - Les résultats de mesures ont permis d'écrire la relation :

microgrammes de captane dans la prise d'essai = 100 (D. 0.).

Les variations ont été trouvées inférieures à 3 p. 100 au-dessus de 10 microgrammes. Bien que moins précises, les mesures sont relativement bonnes au-dessous de 10 microgrammes, quantité pour laquelle la densité optique est égale à 0,10.

EXTRACTION DU VIN

Note importante - En raison de la toxicité à long terme du benzène, opérez toujours sous une hotte ou en atmosphère très ventilée, de manière à éviter l'inhalation de ce solvant.

Dans une ampoule à décantation de 500 ml agitez, pendant 5 mn, 100 ml de vin avec 75 ml de benzène.

Laissez reposer 20 mn et décantez le vin dans un bécher.

Décantez, par l'orifice supérieur de l'ampoule, la phase benzénique dans un bécher de 200 ml. Séchez avec 1 g environ de Na, SO, anhydre. Remettez le vin dans l'ampoule et agitez-le avec 25 nouveaux ml de benzène.

Après repos, soutirez la phase vineuse et décantez la phase benzénique dans un bécher sec.

Décantez ou filtrez la première phase benzénique dans le ballon de l'évaporateur rotatif, lavez le sulfate de sodium et le filtre avec la deuxième phase benzénique et évaporez les extraits combinés sous vide presque à sec, mais pas à siccité. Reprenez le résidu par 10 ml de benzène, et agitez avec un gramme de charbon "Nuchar attaclay", pour éliminer les pigments du vin qui interféreraient sur la couleur.

Filtrez dans le tube en verre résistant à la chaleur à rodage 45-50 ml, lavez le charbon actif par 10 ml de benzène, et réduisez le volume à 1 ou 2 ml environ, au bain-marie, sous hotte, et avec l'aide d'un jet d'air froid projeté dans l'axe du tube.

Introduisez ensuite, successivement :

1 g de résorcine ;

1,5 ml de décane et 3,5 ml d'octane.

Adaptez le dispositif réfrigérant et continuez comme il est indiqué pour la gamme d'étalonnage.

RESULTATS

A partir de 100 ml de vin, la teneur en mg/l (mg de captane par litre) se trouve être numériquement égale à la densité optique lue à 438 nm.

RENDEMENT

Le rendement de l'ensemble des opérations : extraction, purification et colorimétrie est voisin de 85 p. 100 pour des teneurs de 0,1 mg/l de captane introduites dans le vin.

La purification de l'extrait est nécessaire pour éviter une réaction parasite. Un vin rouge non traité, soumis à l'analyse sans purification de l'extrait, a donné une coloration correspondant à une teneur apparente de 0,03 mg/l de ce fongicide.