Le parathon extrait du vin ou du jus de raisin par du benzène en milieu chlorhydrique est dosé par colorimétrie au moyen du chlorhydrate de N - (1 naphtyl) éthylène diamine.

Sensible à 20 microgrammes à partir de 100 ml de boisson, la technique permet le dosage de teneurs comprises entre 0,20 et 4 mg/l de parathion.

MATERIEL

Ampoule à décantation de 500 ml.

Erienmeyer de 125 ml à rodage émeri surmonté de réfrigérant à air amovible de 12 cm environ.

Evaporateur rotatif.

Spectrophotomètre.

REACTIFS

a) Benzène redistillé.

b) Sulfate de boisson cristallisé pur.

c) Alcool à 95° redistillé sur potasse.

d) Ether éthylique fraîchement distillé.

e) Acide chlorhydrique 6 N (HCl pur dilué au demi).

f) Paraffine.

g) Zinc en poudre.

h) Solution A :

Alcool à 95° ... 100 ml.

Eau distillée ... 200 ml.

Acide chlorhydrique 6 N ... 20 ml.

Solutions à préparer extemporanément :

i) Solution du nitrite de sodium à 0,25 g p. 100 ml.

j) Solution de sulfamate d'ammonium à 2,5 g p. 100 ml.

k) Réactif au chlorhydrate de N - (1 naphtyl) éthylène diamine (Eastman Kodak n° 4835) à 1,00 g p. 100 ml.

l) Solution de référence de parathion :

Préparez une dilution de parathion dans l'alcool à 95° titrée à 40 microgrammes par ml.

MODE OPERATOIRE

Extraction

Dans une ampoule à décantation de 250 ml, introduisez :

100 ml de vin ou de jus de raisin.

0,5 ml d'acide chlorhydrique dilué au demi.

15 g environ de sulfate de sodium cristallisé.

50 ml de benzène.

Agitez modérément pendant dix minutes ; après un repos suffisant pour une bonne séparation des phases, évacuez la phase aqueuse dans une deuxième ampoule à décantation et agitez à nouveau cinq minutes avec un nouveau volume de 50 ml de benzène. Laissez reposer.

Lavez le benzène de la première ampoule avec 10 à 15 ml d'eau distillée. Evacuez le vin épuisé de la deuxième ampoule et y introduire l'eau de lavage soutirée de la première ampoule.

Après agitation et repos, évacuez l'eau de lavage.

Refaire un deuxième lavage de la première et de la deuxième ampoule avec 10 ml d'eau distillée ; rassemblez les phases benzéniques dans le ballon de l'évaporateur rotatif.

Concentrez sous vide jusqu'à ce qu'il ne subsiste que 5 à 10 ml de liquide.

Colorimétrie

Transvasez le résidu dans un erlenmeyer.

Récupérez soigneusement le résidu au moyen de plusieurs lavages de l'intérieur du ballon par des fractions de 5 ml environ d'éther éthylique.

Evaporez au bain-marie, avec l'aide d'un jet d'air froid plongeant à l'intérieur de l'erlenmeyer, l'éther ainsi utilisé.

Introduisez ensuite dans l'erlenmeyer :

32 ml de solution A.

2 g de paraffine.

0,5 g de zinc pulvérulent.

Fixez le crachoir sur l'erlenmeyer. Abandonnez exactement dix minutes au-dessus du bain-marie bouillant. Retirez et plongez dans un bac d'eau glacée.

Disposez au-dessus d'un ballon de 100 ml un petit entonnoir muni d'un léger tampon de coton hydrophile.

Lorsque la paraffine est solidifiée, décantez le liquide sur le filtre.

Ajoutez 5 ml d'eau distillée à l'erlenmeyer et reposer sur le bain-marie jusqu'à fusion de la paraffine. Agitez. Laissez refroidir dans la glace. Filtrez à nouveau à la suite.

Recommencez deux fois cette opération (15 ml d'eau au total).

Ajoutez ensuite dans le ballon jaugé :

1 ml de nitrite de sodium à 0,25 p. 100.

Agitez quinze secondes et laissez reposer dix minutes.

1 ml de sulfamate d'ammonium à 2,5 p. 100. Agitez quinze secondes et laissez reposer dix minutes.

2 ml de réactif E. K. 4835 à 1 p. 100. Agitez quinze secondes et laissez reposer dix minutes.

2 ml d'HCl 6 N.

50 ml d'alcool à 95, ou la quantité suffisante pour compléter à 100 ml.

Mélangez. Mesurez la teinte obtenue à 555 microns dans une cuve de 1 cm d'épaisseur et par rapport à un témoin obtenu dans les mêmes conditions, en opérant à partir de 32 ml de solution A, etc..

Etalonnage

L'étalonnage sera effectué par les mesures réalisées à partir de 0 - 20 - 50 - 100 - 150 et 200 microgrammes de parathion.

A titre indicatif, un étalonnage a permis d'établir la relation :

q mg = 08 x D.

q = mg de parathion dans la prise d'essai.

Les vins et les jus de raisin exempts de parathion et de ses dérivés ne donnent aucune coloration : la densité optique étant de l'ordre de 0,003 par rapport au témoin.

Cette technique colorimétrique donne un résultat positif avec le parathion, le parathion-méthyl, le para oxon, le fénitrothion, le chlorthion, l'E. P. N. et le p nitro phénol.