1. Objet et domaine d'application.

Détermination de la teneur en azote total des produits diététiques et de régime.

2. Définition.

Par teneur en azote total des produits diététiques et de régime il faut entendre la masse exprimée en pourcentage des résultats obtenus selon la méthode ci-après.

3. Principe de la méthode.

L'azote total est dosé par volumétrie après minéralisation selon la méthode de kjeldahl et distillation.

4. Réactifs.

L'eau utilisée est de l'eau distillée ou de pureté équivalente.

4.1. Solution titrée d'acide sulfurique à 0,02 N.

4.2. Solution titrée d'acide sulfurique à 0,1 N.

4.3. Acide sulfurique concentré exempt d'azote (phi =

1,83 g/ml).

4.4. Solution d'hydroxyde de sodium exempt de carbonate (phi =

1,33 g/ml).

4.5. Solution d'acide borique et d'indicateur :

Acide borique : 40 g ;

Eau bouillante : 1.000 ml.

Après refroidissement, ajouter 10 ml d'une solution d'indicateur approprié, par exemple :

a) Rouge de méthyle : 0,05 g ;

Ethanol à 95 % : 100 ml

ou

b) Solution alcoolique de rouge de méthyle à 0,05 % : 80 ml ;

Solution aqueuse de bleu de méthylène à 0,01 % : 20 ml.

Selon le pouvoir colorant du bleu de méthylène utilisé, augmenter ou réduire la proportion de la solution de manière à obtenir au pH 5,5 une teinte grise,

ou

c) Rouge de méthyle : 0,06 g ;

Vert de bromocrésol : 0,095 g ;

Ethanol à 95 % : 100 ml.

4.6. Mélange catalyseur :

a) Sulfate de potassium : 100 g ;

Sulfate de cuivre cristallisé à 5 H20 : 10 g ;

Broyer et homogénéiser soigneusement ;

b) Tout autre catalyseur d'efficacité équivalente.

5. Appareillage.

Matériel courant de laboratoire, et notamment :

5.1. Matras de minéralisation et boule pédiculée de dimensions appropriées.

5.2. Appareil pour distillation de l'ammoniac, de préférence par entraînement à la vapeur d'eau.

6. Mode opératoire.

6.1. Prise d'essai :

Introduire dans le matras (5.1) une prise d'essai pesée à 1 mg près. Cette prise d'essai correspondra à une masse de matière sèche comprise entre 0,5 et 5 g suivant la teneur présumée en azote et le degré d'homogénéisation du produit.

6.2. Minéralisation :

Selon la nature et la qualité d'échantillon à traiter, ajouter 6 à 10 g de catalyseur (4.6), 15 à 25 ml d'acide sulfurique (4.3) et une bille de verre.

Chauffer d'abord avec précaution jusqu'à disparition de la mousse, puis plus fortement jusqu'à obtention d'un liquide clair et limpide.

Prolonger l'ébullition pendant une heure au moins.

Laisser refroidir le matras obturé.

Dans certains cas, il sera pratique de commencer l'attaque à froid et de maintenir le matras à la température ambiante sous une hotte pendant toute une nuit, avant de procéder au chauffage.

6.3. Distillation et titrage de l'ammoniac :

Il y a intérêt à conduire simultanément ces deux opérations pour apprécier avec netteté la fin de l'entraînement de l'ammoniac.

Adapter directement le matras à l'appareil à distiller (5.2) ou transvaser quantitativement dans un ballon à distillation et diluer par addition de 300 ml d'eau. Alcaliniser en ajoutant de 60 à 100 ml de la solution d'hydroxyde de sodium (4.4). Cette addition doit se faire avec précaution pour éviter les pertes d'ammoniac. L'ammoniac libéré par l'alcalinisation est distillé. Le distillat est recueilli dans une fiole conique contenant 10 à 20 ml de solution d'acide borique et d'indicateur (4.5).

Titrer par une solution d'acide sulfurique (4.1 ou 4.2) jusqu'à persistance du point de virage.

7. Expression des résultats.

7.1. Mode de calcul et formule :

La teneur en azote total exprimée en grammes d'azote pour 100 g d'échantillon est égale à :

n1 x 0,0014 x 100/P n2 x 0,00028 x 100/P

n1 est le volume en millilitres de la solution sulfurique 0,1 N nécessaire (4.2) ;

n2 est le volume en millilitres de la solution d'acide sulfurique 0,02 N nécessaire (4.1) ;

P est la masse en grammes de la prise d'essai (6.1).

7.2. Répétabilité :

La différence entre les résultats de deux déterminations effectuées simultanément ou rapidement l'une après l'autre par le même analyste, dans les mêmes conditions opératoires, ne doit pas excéder 0,05 g.

7.3. Conversion en protides :

Le résultat de la détermination est exprimé en protides conventionnellement après multiplication par un coefficient approprié correspondant à la composition du produit. Ce facteur doit apparaître dans l'expression des résultats ; il est de 5,7 pour les produits composés à 90 % de dérivés de céréales et de 6,25 dans tous les autres cas.

La conversion ne peut s'effectuer au moyen de ces coefficients que si l'azote provient des protides.

8. Observations

Il est recommandé d'effectuer la vérification des appareils utilisés en procédant aux essais suivants :

8.1. Essai de minéralisation à partir d'une solution de référence (acétanilide par exemple).

8.2. Essai à blanc dans les conditions du dosage.